一、移液操作要精準(zhǔn)

?校準(zhǔn)移液器?：定期用電子天平校準(zhǔn)，確保加樣體積準(zhǔn)確，減少人為誤差。

?預(yù)潤(rùn)濕吸頭?：加樣前用洗滌液潤(rùn)濕吸頭，避免氣泡干擾，提升重復(fù)性。

?練習(xí)加樣速度?：在空白板上練習(xí)快速加樣，縮短加樣時(shí)間差，減少孔間差異。

二、洗板步驟要規(guī)范

?使用洗板機(jī)?：自動(dòng)洗板能保證每孔洗滌時(shí)間和力度一致，降低CV值。

?手工洗板注意?：若手動(dòng)操作，確保每孔洗滌時(shí)間、力度相同，避免殘留不均。

三、ELISA試劑盒與樣本處理

?平衡至室溫?：所有試劑和樣本使用前室溫平衡30分鐘，減少溫度差異影響。

?樣本稀釋優(yōu)化?：低濃度樣本適當(dāng)稀釋?zhuān)岣咝旁氡?，減少背景干擾。

四、實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)優(yōu)化

?設(shè)置復(fù)孔?：每個(gè)樣本做3-5個(gè)復(fù)孔，取平均值，降低單次測(cè)量誤差。

?預(yù)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證?：通過(guò)棋盤(pán)滴定法優(yōu)化抗體濃度，選擇OD值接近1.2且背景的組合。

五、設(shè)備與質(zhì)控

?校準(zhǔn)酶標(biāo)儀?：定期校準(zhǔn)，確保讀數(shù)準(zhǔn)確，避免設(shè)備誤差。

?設(shè)置質(zhì)控孔?：每板加陰陽(yáng)性對(duì)照，批內(nèi)CV應(yīng)<10%，批間CV<15%。

六、其他注意事項(xiàng)

?避免交叉污染?：使用一次性吸頭和封板膜，防止孔間污染。

?樣本處理?：凍融樣本充分混勻，渾濁樣本離心或過(guò)濾后檢測(cè)。