特別提示：本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！

熒光染料的優(yōu)點(diǎn)：
產(chǎn)品僅用于科研使用簡便；
可以與任何PCR產(chǎn)物結(jié)合；
價格便宜；
熒光染料的缺點(diǎn)：
不能區(qū)分不同的雙鏈DNA
引物二聚體會影響檢測的敏感性
非特異性產(chǎn)物會影響結(jié)果的敏感性
引物二聚體和非特異性擴(kuò)增問題可以通過熔解曲線 (Melting curve) 進(jìn)行識別，進(jìn)而通過PCR引物的設(shè)計和反應(yīng)條件的優(yōu)化得以解決。總的來說，SYBR Green I方法是一種基礎(chǔ)也的Real-time qPCR實(shí)驗(yàn)手段。
?
熒光探針：
Real-e qPCR中的熒光探針為TaqMan探針，其基本原理是依據(jù)目的基因設(shè)計合成一個能夠與之特異性雜交的探針，該探針的5'端標(biāo)記熒光基團(tuán)，3'端標(biāo)記淬滅基團(tuán)。
正常情況下兩個基團(tuán)的空間距離很近，熒光基因因淬滅而不能發(fā)出熒光。PCR擴(kuò)增時，引物與該探針同時結(jié)合到模板上，探針的結(jié)合位置位于上下游引物之間。
當(dāng)擴(kuò)增延伸到探針結(jié)合的位置時，Taq酶利用5'外切酶活性，將探針5'端連接的熒光分子從探針上切割下來，從而使其發(fā)出熒光。檢測到的熒光分子數(shù)與PCR產(chǎn)物的數(shù)量成正比，因此，根據(jù)PCR反應(yīng)體系中的熒光強(qiáng)度即可計算出初始DNA模板的數(shù)量。
TaqMan探針技術(shù)解決了熒光染料與非特異性擴(kuò)增結(jié)合的問題，反應(yīng)結(jié)束后無需通過熔解曲線檢測，縮短了實(shí)驗(yàn)時間。
TaqMan探針技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)：
熒光背景低；
敏感性高；
雜交穩(wěn)定性高；
熒光光譜分辨率好；
特異性高。
TaqMan探針技術(shù)的缺點(diǎn)：
成本高；
設(shè)計難度大；
只能用于檢測產(chǎn)物長度低于150bp的反應(yīng)。
由于TaqMan探針的高特異性，可用于等位基因的辨別，特別適用于人類基因多態(tài)性以及根據(jù)SNP區(qū)別和定量菌株。
PCR技術(shù)的定量原理：
擴(kuò)增曲線
在Real- qPCR中，對整個PCR反應(yīng)擴(kuò)增過程進(jìn)行了實(shí)時的檢測并記錄其熒光信號，隨著反應(yīng)的進(jìn)行，監(jiān)測到的熒光信號可以繪制成一條曲線，即為擴(kuò)增曲線。熒光擴(kuò)增曲線一般分為基線期、指數(shù)增長期和平臺期。
在Real-time qPCR擴(kuò)增早期，擴(kuò)增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋，無法判斷產(chǎn)物量的變化，此時即為基線期。
PCR反應(yīng)過程中產(chǎn)生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)形式增加的，隨著反應(yīng)循環(huán)數(shù)的增加，終PCR反應(yīng)不再以指數(shù)形式生成模板，從而進(jìn)入“平臺期”。在該時期，擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加，PCR的終產(chǎn)物量與起始模板量之間無線性關(guān)系，所以根據(jù)終的PCR產(chǎn)物量不能計算出初始模板量。
?
熒光定量PCR原理：
產(chǎn)品僅用于科研熒光定量PCR早稱TaqMan PCR，后來也叫Real-Time PCR，是美國PE（Perkin Elmer）公司1995年研制出來的一種新的核酸定量技術(shù)。該技術(shù)是在常規(guī)PCR基礎(chǔ)上加入熒光標(biāo)記探針或相應(yīng)的熒光染料來實(shí)現(xiàn)其定量功能的。其原理：隨著PCR反應(yīng)的進(jìn)行，PCR反應(yīng)產(chǎn)物不斷累計，熒光信號強(qiáng)度也等比例增加。每經(jīng)過一個循環(huán)，收集一個熒光強(qiáng)度信號，這樣我們就可以通過熒光強(qiáng)度變化監(jiān)測產(chǎn)物量的變化，從而得到一條熒光擴(kuò)增曲線圖。
一般而言，熒光擴(kuò)增曲線可以分成三個階段：熒光背景信號階段，熒光信號指數(shù)擴(kuò)增階段和平臺期。在熒光背景信號階段，擴(kuò)增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋，無法判斷產(chǎn)物量的變化。而在平臺期，擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加，PCR 的終產(chǎn)物量與起始模板量之間沒有線性關(guān)系，根據(jù)終的 PCR 產(chǎn)物量也不能計算出起始 DNA 拷貝數(shù)。只有在熒光信號指數(shù)擴(kuò)增階段， PCR產(chǎn)物量的對數(shù)值與起始模板量之間存在線性關(guān)系，我們可以選擇在這個階段進(jìn)行定量分析。為了定量和比較的方便，在實(shí)時熒光定量 PCR 技術(shù)中引入了兩個非常重要的概念：熒光閾值和 CT值。
孟魯司特鈉C26H29O16Cl2-氯-6-氟

孟魯司特鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)C26H29ClO151-基-(反-乙基環(huán)己基)

β-葡聚糖酶C16H22O4乙基酸

2-脫氧-L-胸苷/替比夫定C54H92O24四丁基氯化銨(水合物)

替比夫定(標(biāo)準(zhǔn)品)C54H92O24溴-5-氯甲

輪環(huán)藤寧/1,4,7,10- 四氮雜環(huán)十二烷 C48H82O192-溴喹喔啉

雷替曲塞C48H82O19(S)-(-)-1-(甲氧基)乙

L-鳥氨酸 L-天門冬氨酸鹽C30H46O3辛酸戊酯

雙嘧達(dá)莫C29H44O6氨基-7H-吡咯并[2,D]嘧啶硫酸鹽

他米巴羅汀C42H72O147-氧代-7-氮雜吲哚

文多靈C30H44O71-(2-吡啶)哌啶單鹽酸鹽

羅丹明B；玫瑰紅BC19H28O3基-氟酸

頭孢哌酮;頭孢哌酮酸C12H14O46-氯

頭孢哌酮(標(biāo)準(zhǔn)品)C16H22O111-溴-2,4,5-三氯

異硫酸羅丹明BC10H10O43,3'5,5'-四甲基聯(lián)雙酚二縮水甘油

羅丹明6G/性紅1/玫瑰紅6GC13H10O3甲-N,N-二甲基腙

麗絲羅丹明B/酸性紅52/磺酰羅丹明B C30H48O5FMOC-D-氨酸

麗絲羅丹明B/酸性紅52/磺酰羅丹明B C30H48O41-Boc-哌
禽腺病毒探針法熒光PCR檢測試劑盒酮酸激酶(PK)ELISA試劑盒CEA  癌胚抗原單克隆抗體（檢測）100 ul

二酰輔酶A脫羧酶,線粒體(MLYCD)ELISA試劑盒CEAcam8/CD67  癌胚抗原相關(guān)細(xì)胞粘附分子8抗體100 ul

二酸單酰輔酶A(malonyl CoA) ELISA試劑盒cellulase  纖維素酶抗體100 ul

二(MDA)ELISA試劑盒CEBP-alpha   轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子C/EBP α 抗體100 ul

氨酸轉(zhuǎn)氨酶/谷轉(zhuǎn)氨酶(ALT/GPT)ELISA試劑盒Phospho-CEBP alpha (Ser21)  酸化轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子CEBP α 抗體20 ul

表皮生長因子受體(EGFR)ELISA試劑盒Phospho-CEBP alpha (Thr222/226)  酸化轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子CEBP α 抗體100 ul

表皮生長因子(EGF)ELISA試劑盒CEBP Beta  轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子C/EBP β抗體100 ul

氨酸(LPA)ELISA試劑盒Phospho-CEBP beta (Ser105)  酸化轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子CEBP β抗體1 mg

胞外超氧化物歧化酶[Cu-Zn](SOD3)ELISA試劑盒Phospho-CEBP beta (Thr235)  酸化轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子CEBP β抗體1 Kit